产品目录

本制品是用2%浓度琼脂糖制备成的球型颗粒，作为凝胶层析介质使用。本制品为传统的琼脂糖介质，具有非特异性吸附低，回收率高，可多次重复使用等特点，用于分子量差异大、对分辨率要求不高的样品的凝胶层析纯化。

• 检测条件^*：层析柱10mm×300mm，柱床高5cm,25℃，流动相为0.1mol/L NaCl。

本制品应密封贮存在通风、干燥、清洁的地方，不能冷冻，保存溶液为20%乙醇。

• 上样之前，样品必须经过膜过滤及去除色素，否则杂质及色素会被吸附到填料上，影响填料的正常使用。所有的缓冲液均需要用0.45μm的过滤器过滤。
  
• 在使用过程中，避免使用高浓度的强酸强碱，酸和碱的浓度应低于0.1mol。碱会使流速变慢。
  
• 不同的样品，吸附和洗脱方法不相同，可以根据相关的文献进行。

• 装柱：
  
  • 让所有的材料和试剂均平衡至层析实验的温度。配制缓冲液，对所有的缓冲液进行脱气处理。
    
  • 检查层析柱所有部件，特别是过滤网，密封圈，螺旋塞是否紧密，玻璃管是否干净和完整。
    
  • 根据需要量取相应量的凝胶，用去离子水清洗掉20%乙醇。
    
  • 将柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位，务必使底端无气泡。
    
  • 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
    
  • 打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过，使柱床稳定。
  • 注意压力不要超过填料最大耐压。
• 平衡：上样前平衡层析柱至少5～10个柱体积，直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的pH值和电导值等于上柱Buffer的pH值和电导值)。
• 上样：
  • 样品用平衡液配制，样品一定要离心或过滤后上样(0.45μm滤膜)，如果样品盐浓度太大，则需要处理后再上样。
    
  • 推荐的上样量不超过柱体积的5%。
• 洗脱：用缓冲液洗脱，洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。
  
• 再生：一般用缓冲液洗到平衡，可再次使用。在一些应用中，诸如变性蛋白质或脂质体物质在再生过程中洗脱不掉。出现下面这些情况，是必须需要清洗再生的。
  
  • 背压增加；
    
  • 色谱柱顶部的颜色变化；
    
  • 分辨率降低；
    
  • 转换接头和凝胶表面之间出现空隙。
  如果观察到压力增大，在开始柱清洁程序之前先检查管路中的各个过滤阀、过滤膜是否被污染，然后通过用0.1M NaOH洗涤柱子，除去沉淀的蛋白质，非特异性结合的蛋白质和脂蛋白。